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CD圓二色光譜|華洋科儀
  • 發布時間 : 2023-05-19 10:05:00
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華洋科儀圓二色光譜是使用最為廣泛的測定蛋白質二級結構的辦法,是研討稀溶液中蛋白質構象的一種快速、簡略、較精確的辦法。它可以在溶液狀況下測定,較接近其生理狀況。而且測定辦法快速簡潔,對構象改變靈敏,所以它是現在研討蛋白質二級結構的首要手法之一,并已廣泛使用于蛋白質的構象研討中。

圓二色光譜儀


用于揣度非對稱分子的構型和構象的一種旋光光譜。光學活性物質對組成平面偏振光的左旋和右旋圓偏振光的吸收系數(ε)是不相等的,εL≠εR,即具有圓二色性。假如以不同波長的平面偏振光的波長λ為橫坐標,以吸收系數之差Δε=εL-εR為縱坐標作圖,得到的圖譜即是圓二色光譜,簡稱CD。



假如某手性化合物在紫外可見區域有吸收,就可以得到具有特征的圓二色光譜。因為εL≠εR,透射光不再是平面偏振光,而是橢圓偏振光,摩爾橢圓度[θ]與Δε的關系為:[θ]=3300Δε。圓二色譜也可以摩爾橢圓度為縱坐標,以波長為橫坐標作圖。因為△ε有正值和負值之分,所以圓二色譜也有呈峰的正性圓二色譜和呈谷的負性圓二色譜。在紫外可見光區域測定圓二色譜與旋光譜,其意圖是揣度有機化合物的構型和構象。
樣品要求
1. 樣品有必要堅持一定的純度不含光吸收的雜質,溶劑有必要在測定波長沒有吸收攪擾;樣品能徹底溶解在溶劑中, 構成均一通明的溶液。
2. 氮氣流量的操控
3. 緩沖液、溶劑要求與池子挑選:緩沖液和溶劑在制造溶液前要做獨自的檢查,看是否在測定波長規模內有吸收攪擾,看是否構成沉淀和膠狀;在蛋白質測量中,經常挑選通明性極好的磷酸鹽作為緩沖體系。
4. 樣品濃度與池子挑選
樣品不同,測定的圓二色光譜規模不同,對池子巨細(光徑)的挑選和濃度的要求也不一樣。蛋白質CD光譜測量一般在相對較稀的溶液中進行。
原理
圓二色光譜選用特性少高効率的28度入射角干涉儀、集光効率高的光學系、掃除雙折射元件的反射光學系,高精度操控光軸,經過操控偽影和經時改變使裝置始終堅持佳狀況。圓二色光譜由合適VCD的演算法的DSP確定檢測功用、完成了信噪比的大幅度改進,經過使用只透過VCD光譜測量目標吸收帶的窄帶濾光片,可以測得現有辦法測不到的微小波峰。

根據圓二色光譜法的原理和測試要求規劃制成的儀器稱為圓二色光譜儀。現在圓二色光譜法及其儀器已廣泛使用于有機化學、生物化學、配位化學和藥物化學等領域,成為研討有機化合物的立體構型的一個重要辦法。   

使用圓二色光譜相關儀器時需要留意以下幾點要求
1. 儀器發生毛病時應及時報告技術人員處理.儀器發生異常現象時,馬上封閉電源,維護現場并及時上報。
2. 不亂按鍵盤,操作人員不得進入操作規程規則以外的任何程序,不得按規則以外的任何功用鍵.卸下火花臺板時要輕拿輕放,避免內表面劃傷.取出火花室內圓石英墊片和玻璃套管時必須謹慎小心,避免操作不當致其破碎。
3. 壓樣品夾子要筆直,不得在未夾好樣品時按激起鍵,不得在激起時接觸或抬起樣品夾.假如遇到激起時聲響很大,應該按F3鍵中止,不允許直接抬起樣品夾,否則易造成電路板燒毀。
4. 激起樣品后在火花臺內發生黑色沉積物可導致電極與火花臺之間短路,所以火花臺應定期整理。
5. 非崗位人員不得隨意進入機房,機房內禁止吸煙,吃食物。
6. 假如遇到突然斷電時,應先關總,再將其它電源封閉,等到來電后,按規程條款進行開機操作。
圓二色光譜的特色
1. 雙光源規劃帶來無可比擬的信噪比,技術可晉級,可使在測量固體樣品時消除固體樣品自身的誤差,同時采集紅外光譜和振蕩圓二色光譜。圓二色光譜數字信號處理,而無需確定或者電子濾波,獨立的紅外光源接口、PEM的恒溫對應可以獲得沒有經時改變的基線。
2. 選用特性少高効率的28度入射角干涉儀、集光効率高的光學系、掃除雙折射元件的反射光學系,高精度操控光軸,經過操控偽影和經時改變使裝置始終堅持zui佳狀況。圓二色光譜由合適VCD的演算法的DSP確定檢測功用、完成了信噪比的大幅度改進,經過使用只透過VCD光譜測量目標吸收帶的窄帶濾光片,可以測得現有辦法測不到的微小波峰。

3. 光學系、樣品室、檢測器都可以進行吹掃、可不受大氣的影響安穩測量,一機多功用,可檢測紫外吸收光譜,圓二色光譜,總熒光譜,光散色譜, 線二色譜及熒光各相異性譜。圓二色光譜首要用于手性光學活性物質的研討。可用于有機立體化學研討、光學活性物質純度測試、藥物定量分析、天然有機化學、生物化學與宏觀大分子、金屬絡合物化學、聚合物化學、蛋白質折疊研討、蛋白質構象研討、物理化學等。

4. 橫電磁波,是一種在各個方向上振蕩的射線。其電場矢量E 與磁場矢量H 相互筆直,且與光波傳達方向筆直。因為發生感光作用的首要是電場矢量,一般就將電場矢量作為光波的振蕩矢量。光波電場矢量與傳達方向所組成的平面稱為光波的振蕩面。若此振蕩面不隨時刻改變,這束光就稱為平面偏振光,其振蕩面即稱為偏振面。

5. 平面偏振光可分解為振幅、頻率相同,旋轉方向相反的兩圓偏振光。其間電矢量以順時針方向旋轉的稱為右旋圓偏振光,其間以逆時針方向旋轉的稱為左旋圓偏振光。兩束振幅、頻率相同,旋轉方向相反的偏振光也可以合成為1束平面偏振光。假如兩束偏振光的振幅(強度) 不相同,則合成的將是1束橢圓偏振光。 
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