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圓二色光譜具有安全便捷的優點
  • 發布時間 : 2018-05-16 15:09:45
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圓二色光譜具有安全便捷的優點
   圓二色光譜用于推斷非對稱分子的構型和構象的一種旋光光譜。光學活性物質對組成平面偏振光的左旋和右旋圓偏振光的吸收系數(ε)是不相等的,εL≠εR,即具有圓二色性。如果以不同波長的平面偏振光的波長λ為橫坐標,以吸收系數之差Δε=εL-εR為縱坐標作圖,得到的圖譜即是圓二色光譜,簡稱CD。
   如果某手性化合物在紫外可見區域有吸收,就可以得到具有特征的圓二色光譜。由于εL≠εR,透射光不再是平面偏振光,而是橢圓偏振光,摩爾橢圓度[θ]與Δε的關系為:[θ]=3300Δε。圓二色譜也可以摩爾橢圓度為縱坐標,以波長為橫坐標作圖。由于△ε有正值和負值之分,所以圓二色光譜也有呈峰的正性圓二色譜和呈谷的負性圓二色譜。在紫外可見光區域測定圓二色光譜與旋光譜,其目的是推斷有機化合物的構型和構象。
   樣品必須保持一定的純度不含光吸收的雜質,溶劑必須在測定波長沒有吸收干擾,樣品能完全溶解在溶劑中,形成均一透明的溶液。圓二色光譜緩沖液、溶劑要求與池子選擇,緩沖液和溶劑在配制溶液前要做單獨的檢查,看是否在測定波長范圍內有吸收干擾, 看是否形成沉淀和膠狀;在蛋白質測量中,經常選擇透明性極好的磷酸鹽作為緩沖體系。
   樣品不同,測定的圓二色光譜范圍不同,對池子大小的選擇和濃度的要求也不一樣。蛋白質CD光譜測量一般在相對較稀的溶液中進行。橢圓率和摩爾橢圓率都依賴于測量條件。因此,溫度、波長和樣品濃度總是應該特別注明的。當用壓片法或石蠟油研磨法進行固體粉末樣品測試時,要盡可能地研磨獲得細小均勻的樣品顆粒。圓二色光譜采用石蠟油糊方法時,必須注意某些憎水有機化合物可能溶于石蠟油中,這時所得圓二色光譜在某種意義上應視為溶液CD光譜。
   圓二色光譜采用壓片法測試固體CD時,在保證手性樣品的定性濃度達到CD光譜儀檢測要求的同時,片越薄越透明越好(但切忌破損)。在某些情況下,壓片法不適用于手性抗衡陰離子存在下的固體誘導CD光譜的測定。
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