激子耦合圓二色發(fā)生于大分子兩個(gè)手性生色團(tuán)之間。當(dāng)兩個(gè)生色團(tuán)位置合適（距離短、角度合適、環(huán)境合適等），它們互相電子轉(zhuǎn)移產(chǎn)生兩個(gè)不同的CD帶，如圖1所示。激子耦合圓二色靈敏度和識(shí)別度高，它與給定的空間結(jié)構(gòu)相關(guān)，可以獲得復(fù)雜結(jié)構(gòu)的絕對(duì)構(gòu)型信息。激子耦合圓二色經(jīng)常用在高分子、手性有機(jī)凝膠和其他手性大分子的可見(jiàn)光區(qū)，也可用于蛋白的近紫外區(qū)，是傳統(tǒng)遠(yuǎn)紫外圓二色譜的補(bǔ)充。
圖1：激子耦合能級(jí)說(shuō)明
二、實(shí)驗(yàn)條件
2-氨基嘌呤是經(jīng)典的熒光標(biāo)記物，它與胸腺嘧啶或胞嘧啶配對(duì)。當(dāng)兩個(gè)2-氨基嘌呤相距較近，它們手性中心相互作用，大分子會(huì)扭曲并改變構(gòu)象，這會(huì)產(chǎn)生激子耦合圓二色。本應(yīng)用說(shuō)明了在DNA和蛋白相互作用中，由2-氨基嘌呤導(dǎo)致的激子耦合圓二色。測(cè)試儀器為MOS-500圓二色光譜儀，波長(zhǎng)范圍為300-360 nm，狹縫為2 nm，采樣速度為每點(diǎn)0.5 s。樣品濃度為10 uM，石英比色池光程為1 cm，室溫，沒(méi)有氮?dú)獯祾摺？瞻撞捎猛瑮l件測(cè)試并自動(dòng)扣減。
三、結(jié)果
含有2-氨基嘌呤的DNA-蛋白復(fù)合物的圓二色譜如圖3所示。由于DNA自身的圓二色吸收信號(hào)一直到310 nm，所以DNA-蛋白復(fù)合物的圓二色譜中只看得到正的克頓效應(yīng)。最大信號(hào)在330 nm處為1.2 mdeg，可以看出MOS-500圓二色光譜儀靈敏度很高。通過(guò)對(duì)比可以看到，沒(méi)有加入DNA的圓二色光譜中沒(méi)有對(duì)應(yīng)的與圓二色吸收，通過(guò)圓二色光譜可以很明顯區(qū)分有無(wú)激子耦合發(fā)生，如圖4所示。
圖3：圓二色譜：DNA+蛋白
四、結(jié)論
用標(biāo)準(zhǔn)配置的MOS-500圓二色光譜儀可以很容易的測(cè)到激子耦合圓二色譜。通常激子耦合圓二色測(cè)試波長(zhǎng)大于195nm，而MOS-500圓二色光譜儀在185nm以上不需要氮?dú)獯祾撸梢怨?jié)省您儀器的運(yùn)行成本。
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